Microbiota intestinal y modulación del tejido adiposo en la patogénesis de la obesidad / Gut microbiota and modulation of adipose tissue in the pathogenesis of obesity

Las investigaciones realizadas durante el último siglo relacionadas con la descripción de la Microbiota Intestinal (MI) sugieren una relación concreta entre su composición y la salud del huésped. Su desregulación denominada disbiosis intestinal ha sido asociada a distintos tipos de enfermedades gastrointestinales, metabólicas, oncológicas e incluso psiquiátricas. Destacan numerosos reportes que han informado la condición de disbiosis en la obesidad, tanto en modelos animales como humanos de distintos grupos etarios y regiones del mundo. A su vez, la composición del microbioma también ha logrado asociarse a las diferentes comorbilidades de la obesidad, postulando que la MI posee influencia en la disfunción del tejido adiposo (TA), entendiendo que corresponde al principal modulador de la patogénesis de la obesidad. Sin embargo, aún no es posible establecer una explicación mecanicista plausible. Actualmente, la utilización de tecnologías multiómicas, junto con la evaluación de variables fisiológicas, nos podrían proporcionar una mejor comprensión a la incógnita planteada. Frente a esto, el presente trabajo tiene como objetivo revisar los últimos avances en la comprensión de la influencia de la microbiota intestinal en el TA y su contribución a los mecanismos relacionados con la patogénesis de la obesidad. Entre los principales mecanismos identificados, la evidencia reporta nexos fisiológicos entre la composición de la MI y la modulación de inflamación, permeabilidad intestinal y adipogénesis. Las vías implicadas derivan de la influencia de la disbiosis intestinal en el accionar de ácidos grasos de cadena corta, claudinas, macrófagos, oligosacáridos, entre otros. Los mecanismos implicados, principalmente estudiados en modelos animales, deberían ser considerados para su evaluación en próximos estudios longitudinales y experimentales en humanos con el fin de obtener una mayor comprensión sobre la implicancia de cada mecanismo en la patogenia global de la obesidad(AU)

The investigations carried out during the last century related to the description of the Gut Microbiota (GM) suggest a concrete relationship between its composition and the health of the host. Its deregulation called intestinal dysbiosis has been associated with different types of gastrointestinal, metabolic, oncological and even psychiatric diseases. Numerous reports that have described the condition of dysbiosis in obesity stand out, both in animal and human models of different age groups and regions of the world. In turn, the composition of the microbiome has also been associated with the different comorbidities of obesity, postulating that MI has an influence on adipose tissue (AT) dysfunction, understanding that it corresponds to the main modulator of the pathogenesis of obesity. However, it is not yet possible to establish a plausible mechanistic explanation. Currently, the use of multi-omics technologies, together with the evaluation of physiological variables, could provide us with a better understanding of the question raised. In view of this, this review aims to review the latest advances in understanding the influence of the intestinal microbiota on AT and its contribution to the mechanisms related to the pathogenesis of obesity. Among the main mechanisms identified, the evidence reports physiological links between the composition of GM and the modulation of inflammation, intestinal permeability and adipogenesis. The pathways involved derive from the influence of intestinal dysbiosis on the action of short-chain fatty acids, claudins, macrophages, oligosaccharides, among others. The mechanisms involved, mainly studied in animal models, should be considered for evaluation in future longitudinal and experimental studies in humans in order to obtain a better understanding of the implication of each mechanism in the global pathogenesis of obesity(AU)

Confiabilidad en la medición de la presión inspiratoria máxima y de la capacidad inspiratoria de un fisioterapeuta en entrenamiento / Confiabilidade na mensuração da pressão inspiratória máxima e da capacidade inspiratória de um fisioterapeuta em treinamento / Reliability in the measurement of maximum inspiratory pressure and inspiratory capacity of a physiotherapist in training

RESUMEN Este estudio pretende explorar el impacto de la experiencia clínica en la fiabilidad y consistencia de la medición de la presión inspiratoria máxima (PIM) y la capacidad inspiratoria (CI) durante el período de la entrenamiento clínico. Los 37 participantes fueron evaluados por un fisioterapeuta especializado (FE) y un fisioterapeuta novato (FN), por medio de un pletismógrafo corporal. Se utilizó el coeficiente de correlación intraclase (ICC, en inglés) para analizar la fiabilidad de las pruebas PIM y CI, mientas que para explorar las diferencias individuales se utilizaron los gráficos de Bland-Altman (gB/A). El análisis ICC en tres estudios clínicos demostró excelente fiabilidad interevaluadores (ICC 1°: 0,914; ICC 2°: 0,915; ICC 3°: 0,925) para la prueba PIM y (ICC 1 °: 0,955; ICC 2°: 0,965; ICC 3°: 0,970) para la prueba CI. Sin embargo, la correlación según gB/A entre los evaluadores reveló una tendencia sistemática con resultados absolutos más elevados para FE de 9,2 cmH2O en PIM y 0,06 L en CI, respectivamente. Los resultados demostraron que el FN tuvo habilidades técnicas y de discernimiento fiables en la prueba PIM y CI, pero los pacientes suelen mejorar el rendimiento con un evaluador experimentado. La experiencia del evaluador influye en los resultados obtenidos de la medición de PIM en los pacientes, la formación de un FN requiere la incorporación de más habilidades para que se reconozca su verdadero esfuerzo.

RESUMO O objetivo deste estudo foi explorar o impacto da experiência clínica na confiabilidade e concordância da medição da pressão inspiratória máxima (PIM) e da capacidade inspiratória (CI) em um período de treinamento clínico. Por conveniência, 37 participantes foram avaliados em um pletismógrafo corporal por um fisioterapeuta especializado (FE) e um fisioterapeuta novato (FN). O Coeficiente de Correlação Intraclasse (CCI) foi utilizado para analisar a confiabilidade dos testes PIM e CI; enquanto para explorar as diferenças individuais foram usados os gráficos de Bland-Altman (gB/A). A análise CCI em três ensaios mostrou excelente confiabilidade inter-avaliadores (CCI 1°: 0,914; CCI 2°: 0,915; CCI 3°: 0,925) para o teste PIM e (CCI 1°: 0,955; CCI 2°: 0,965; CCI 3°: 0,970) para o teste de CI. No entanto, a concordância de acordo com gB/A entre os avaliadores, mostrou uma tendência sistemática com resultados absolutos mais altos para FE de 9,2 cmH2O em PIM e 0,06 L em CI, respectivamente. Os resultados sugerem que a FN adquiriu habilidades técnicas e discriminativas confiáveis para o teste PIM e CI, mas os pacientes tendem a melhorar o desempenho com um avaliador experiente. A experiência do avaliador influencia os resultados obtidos a partir da medição do PIM nos sujeitos, a formação de um FN exige a incorporação de mais habilidades para reconhecer um verdadeiro esforço.

ABSTRACT The objective of this study was to explore the impact of clinical experience on the reliability and concordance of maximal inspiratory pressure (MIP) and inspiratory capacity (IC) measurements in a period of clinical training. For convenience, 37 participants in a body plethysmograph were evaluated by an experienced physiotherapist (EF) and a novice physiotherapist (NF). Intra-Class Correlation Coefficient (ICC) was used to analyze the reliability of the MIP and IC tests; to explore the individual differences, the Bland-Altman (gB/A) graphs were used. ICC analysis in three trials showed excellent inter-rater reliability (ICC 1st: 0.914; ICC 2nd: 0.915; ICC 3rd: 0.925) for the MIP test and (ICC 1st: 0.955; ICC 2nd: 0.965; ICC 3rd: 0.970) for the IC test. However, concordance according to gB/A among the evaluators showed a systematic trend with higher absolute scores for EF of 9.2 cmH2O in MIP, and of 0.06 L in IC, respectively. The results suggest that NF acquired reliable technical and discriminative skills for the MIP and IC test, but patients tended to improve performance with an experienced assessor. The evaluator's experience influences the results obtained from the measurement of the MIP in the subjects; the formation of a NF requires incorporating more skills to recognize a sincere and maximum effort.

Association of polymorphisms within the Renin-Angiotensin System with metabolic syndrome in a cohort of Chilean subjects

ABSTRACT Objective Metabolic syndrome (MetS) is associated with hypertension, obesity and dyslipidemia. Thus, genetic variants related with these conditions may modulate its development. We evaluated the effect of polymorphisms in the renin-angiotensin system (RAS) on metabolic syndrome risk in a cohort of Chilean subjects. Subjects and methods A total of 152 subjects, 83 with MetS (51.2 ± 9.6 years) and 69 without MetS (49.5 ± 9.3 years) of both genders were included, according to the ATP III update criteria. The rs4340 Insertion/Deletion (I/D), rs699 (T>C) and rs5186 (A>C) of the ACE, AGT and AGTR1 genes, respectively, were genotyped. Results After adjusting for age and gender, we observed the DD genotype of rs4340 associated with MetS (p = 0.02). Specifically, the DD genotype was associated with MetS risk in women (OR = 4.62, 95%CI, 1.41 – 15.04; p < 0.01). In males, the AA genotype for rs5186 variant was associated with an increased risk for developing MetS when compared with women carrying the same genotype (OR = 3.2; 95%CI, 1.03 – 9.89; p = 0.04). In subjects without MetS, DD genotype was associated with increased waist circumference (p = 0.023) while subjects with MetS carrying the rs5186 TT genotype showed higher levels of HDL-cholesterol (p = 0.031). Conclusion The present study contributes data highlighting the role for RAS polymorphisms in predisposing to metabolic syndrome in Chilean subjects.

Asociación de polimorfismos del gen factor de necrosis tumoral (TNF) con el desarrollo de reestenosis de stent post angioplastía coronaria / Polymorphisms of tumor necrosis factor gen: are they associated to stent restenosis after coronary angioplasty?

Introducción: La intervención coronaria percutánea (PCI en inglés) con implante de stent coronario es uno de los procedimientos más utilizados para la revascularización miocárdica en condiciones agudas o crónicas. Múltiples factores se han relacionado con la restenosis de stent, incluyendo aspectos clínicos, angiográficos, genéticos y epigenéticos. La respuesta inflamatoria en gran parte está determinada genéticamente y probablemente sea el rol más importante en la restenosis. El factor de necrosis tumoral a (TNF-α;) es un mediador clave en la respuesta inflamatoria actuando en sitios de injuria tisular inducida por el daño de las paredes del vaso. Objetivo: Determinar la asociación entre polimorfismos genéticos del TNF y restenosis en pacientes coronarios sometidos a angioplastía. Métodos: Se diseñó un estudio de casos y controles incidentes no pareados, aprobado por el comité de ética institucional. Se incluyeron pacientes con cardiopatía coronaria sometidos a PCI con implante de stent BMS o DES, con un tiempo de control angiográfico mayor de 6 meses. Los casos fueron definidos como aquellos pacientes con estenosis de stent >50% y como controles aquellos con estenosis <50%, con respecto del lumen del vaso de referencia. Se efectuó la genotipificación de los polimorfismos rs361525 (-238G/A) y rs1799964 (-1031 T/C) del gen TNF mediante PCR en tiempo real mediante sondas alelo-específicas. Además, se registraron variables clínicas y demográficas. Resultados: Se incluyó en este estudio de análisis de genotipificación del polimorfismo del gen TNF 82 pacientes como casos, y 102 controles. No hubo diferencias significativas en las siguientes variables clínicas y demográficas: edad (63.7 ± 10.5 vs. 65.4 ± 9.6 años; p=0.24), género masculino (75 vs. 69%, p=0.5), IMC (28.5 ± 3.6 vs. 28 ± 3.8 Kg/m2; p=0.78) y tabaquismo (79 vs. 77%; p=0.7). En contraste, se observó una diferencia significativa en la frecuencia de DM-2 casos y controles (43.2 vs. 26.5%; p=0.03) y %HbA1c entre ambos grupos (6.78 ± 1.5 vs. 6.1 ± 0.8%; p=0.01). Respecto a las variantes genéticas estudiadas, no hubo diferencias significativas en la frecuencia relativa del alelo mutado tanto para el polimorfismo rs361525 (Alelo A, casos: 0.06 vs. controles: 0.08; p=0.37), como para la variante rs1799964 (Alelo C, casos: 0.2 vs. controles: 0.2; p=0.96). Las OR asociadas a dichos alelos fueron 0.68 (I.C. 95%= 0.29 - 1.59) y 0.99 (I.C. 95%= 0.58 - 1.67), respectivamente; confirmando la ausencia de asociación. Conclusión: Nuestros datos sugieren que las variantes genéticas estudiadas no están relacionadas al desarrollo de restenosis en los sujetos estudiados, y probablemente en nuestra población los factores clínicos sean más determinantes para el desarrollo de reestenosis coronaria post angioplastía que los factores genéticos.

Multiple factors have been associated to the development of stent restenosis after coronary angioplasty (PCA). including clinical, angiographic, genetic and epigenetic factors. The inflammatory response is genetically determined and it may be the most important factor. Tumor necrosis factor a (TNFα) is a potent mediator of this response at the endothelial wall. Aim: To determine the association between TNFα; genetic polymorphisms and stent restenosis. Methods: A case-control study was performed in patients submitted to PTCA with stent implantation(-bare metal or drug eluting stent) at least 6 months prior to the study. Cases were defined by the presence of >50% intra stent stenosis. PCR was used for type classification of polymorphisms rs361525 (-238G/A) y rs1799964 (-1031 T/C) of the TNFα; gene. Results: 82 cases and 102 controls were included. No differences were observed in clinical and demographic variables: age (63.7 ± 10.5 vs. 65.4 ± 9.6 years, p=0.24, for cases and controls, respectively), male gender (75 vs. 69%, p=0.5), BMI (28.5 ± 3.6 vs. 28 ± 3.8 Kg/m2, p=0.78) and active smoking (79 vs. 77%, p=0.7). In contrast, Diabetes was more frequent in cases than in controls (43.2 vs. 26.5%, p=0.03). There was no difference in the relative frequency of mutations of the rs361525 polymorphism (Allele A, 0.06 vs 0.08, p=0.37 for cases and controls, respectively) nor for variant rs1799964 (0.2 in both cases and controls). Non significant associations were confirmed by Odd ratios with 0 included in the 95% confidence interval. Conclusion: No association of genetic polymorphisms of TNFa and stent restenosis was found, which suggests that clinical factors my be more important for the development of post PTCA stent restenosis.

Chemical and botanical characterization of Chilean propolis and biological activity on cariogenic bacteria Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus

Propolis is a non-toxic natural substance with multiple pharmacological properties including anticancer, antioxidant, fungicidal, antibacterial, antiviral, and anti-inflammatory among others. The aim of this study was to determine the chemical and botanical characterization of Chilean propolis samples and to evaluate their biological activity against the cariogenic bacteria Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus. Twenty propolis samples were obtained from beekeeping producers from the central and southern regions of Chile. The botanical profile was determined by palynological analysis. Total phenolic contents were determined using colorimetric assays. Reverse phase HPLC and HPLC-MS were used to determine the chemical composition. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined on S. mutans and S. sobrinus. All propolis samples were dominated by structures from native plant species. The characterization by HPLC/MS, evidenced the presence of quercetin, myricetin, kaempferol, rutine, pinocembrin, coumaric acid, caffeic acid and caffeic acid phenethyl ester, that have already been described in these propolis with conventional HPLC. Although all propolis samples inhibited the mutans streptococci growth, it was observed a wide spectrum of action (MIC 0.90 to 8.22 µgmL-1). Given that results it becomes increasingly evident the need of standardization procedures, where we combine both the determination of botanical and the chemical characterization of the extracts. Research conducted to date, describes a promising effectiveness of propolis in the prevention of caries and other diseases of the oral cavity, making it necessary to develop studies to identify and understand the therapeutic targets or mechanisms of molecular action of the various compounds present on them.

La respuesta terapéutica a ezetimiba en ratones C57BL/6 es mediada por cambios en la expresión de NPC1L1, ABCG5 y ABCG8 en el enterocito / Therapeutic response to ezetimibe in C57BL/6 mice is mediated by changes in NPC1L1, ABCG5 and ABCG8 expression in the enterocyte

Las proteínas NPC1L1, ABCG5 y ABCG8 participan en la absorción intestinal de colesterol. Ezetimiba inhibe este proceso bloqueando a NPC1L1, sin embargo, su efecto sobre ABCG5 y ABCG8 aún no está claro. Así, el objetivo del presente trabajo fue evaluar en ratones C57BL/6 con hipercolesterolemia inducida por dieta y tratados con ezetimiba, la expresión de NPC1L1, ABCG5 y ABCG8 mediante PCR en tiempo real y Western blot, en 3 grupos de animales: 1, dieta hipercolesterolémica D12336; 2, dieta D12336 más 5 mg/kg/día de ezetimiba; 3, dieta control. El nivel sérico de colesterol total fue significativamente diferente entre los grupos estudiados (control: 1,85 +/- 0,49 mmol/L; dieta D12336: 3,11 +/- 0,73 mmol/L; ezetimiba: 2,11 +/- 0,50 mmol/L, P = 0,001). La expresión génica de NPC1L1 aumentó 5,4 veces en el grupo que recibió la dieta D12336 (P = 0,003). Por otro lado, la expresión génica de ABCG5 y ABCG8 no fue diferente en el grupo con hipercolesterolemia (P = 0,239 y P = 0,201, respectivamente). Después del tratamiento con ezetimiba, la expresión génica de ABCG5 se incrementó 15,6 veces (P = 0.038). No hubo diferencias significativas en la expresión génica de NPC1L1 (P = 0,134) y ABCG8 (P = 0,067). En relación a la expresión proteica, la dieta D12336 incrementó los niveles de expresión de NPC1L1 (P = 0,022) y ABCG5 (P = 0,008); el tratamiento con ezetimiba incrementó los niveles de NPC1L1 (P = 0,048) y redujo los niveles de ABCG5 (P = 0,036) y ABCG8 (P = 0,016). En conclusión, nuestros resultados sugieren que tanto la dieta hipercolesterolémica como el tratamiento con ezetimiba, en un modelo experimental, afectan los niveles de expresión de NPC1L1, ABCG5 y ABCG8, sugiriendo que ABCG5 y ABCG8 están involucrados en la respuesta hipolipemiante a este fármaco. No obstante, el mecanismo mediante el cual se explica esta interacción requiere de un futuro estudio.

Proteins NPC1L1, ABCG5 and ABCG8 are involved in the intestinal absorption of cholesterol. Ezetimibe inhibits this process by blocking NPC1L1, however, its effect on ABCG5 and ABCG8 is not yet clear. Thus, the objective of this study was to evaluate in C57BL / 6 mice with diet-induced hypercholesterolemia treated with ezetimibe, the expression of NPC1L1, ABCG5 and ABCG8 by real time PCR and Western blot, in 3 groups of animals: 1, diet hypercholesterolemic D12336, 2, D12336 diet plus 5 mg/kg/ day of ezetimibe, 3, diet control. The serum level of total cholesterol was significantly different between groups (control: 1.85 +/- 0.49 mmol / L; diet D12336: 3.11 +/- 0.73 mmol / L; ezetimibe: 2.11 +/- 0.50 mmol / L, P = 0.001). NPC1L1 gene expression increased 5.4-fold in the group receiving the diet D12336 (P = 0.003). Furthermore, the gene expression of ABCG5 and ABCG8 was not different in the group with hypercholesterolemia (P = 0.239 and P = 0.201, respectively). After treatment with ezetimibe, ABCG5 gene expression was increased 15.6 times (P = 0.038). No significant differences in gene expression of NPC1L1 (P = 0.134) and ABCG8 (P = 0.067). Regarding protein expression, the D12336 diet increased the levels of expression of NPC1L1 (P = 0.022) and ABCG5 (P = 0.008), treatment with ezetimibe increased the levels of NPC1L1 (P = 0.048) and reduced levels of ABCG5 (P = 0.036) and ABCG8 (P = 0.016). In conclusion, our results suggest that both hypercholesterolemic diet as treatment with ezetimibe, in an experimental model, affect the expression levels of NPC1L1, ABCG5 and ABCG8, suggesting that ABCG5 and ABCG8 are involved in lipid-lowering response to this drug. However, the mechanism by which this interaction is explained requires further study.

Effect of five single nucleotide polymorphisms of ABCG5 and ABCG8 genes on eLipid-lowering response / Efecto de cinco polimorfismos de los genes ABCG5 y ABCG8 sobre la respuesta hipolipemiante a ezetimiba

In this study we evaluated the possible association between five single nucleotide polymorphisms in ABCG5 (rs6720173) and ABCG8 (rs11887534, rs4148211, rs4148217 and rs6544718) genes and ezetimibe response in Chilean hypercholesterolemic subjects. A total of 60 non-related hypercholesterolemic subjects, aged 18 to 65 years old were included in this study. These subjects were treated with ezetimibe (10mg/day) during one month. The ABCG5 and ABCG8 genotypes were assessed by PCR-RFLP. The genotype distribution of the ABCG5/ABCG8 polymorphisms was in Hardy-Weinberg equilibrium. Our results showed that the investigated polymorphisms were not associated with the response to ezetimibe. Nevertheless, the T allele of rs6544718 polymorphism was related to higher baseline levels of LDL-cholesterol (p<0.001). In addition, the G allele for the rs4148211 polymorphism was associated with greater baseline concentrations of triglycerides (P=0.019). This allele was also associated with lower concentrations of HDL-cholesterol (P=0.027), after ezetimibe treatment. Our results suggest that the studied polymorphisms do not affect the therapeutic response to ezetimibe in the evaluated subjects.

En este estudio se evaluó la posible asociación entre cinco polimorfismos de nucleótido único en los genes ABCG5 (rs6720173) y ABCG8 (rs11887534, rs4148211, rs4148217 y rs6544718) y la respuesta a ezetimiba en pacientes hipercolesterolémicos chilenos. Un total de 60 individuos hipercolesterolemicos, no relacionados, con edades entre 18 y 65 años fueron incluidos. Estos sujetos fueron tratados con ezetimiba (10mg/día) durante un mes. Los genotipos de ABCG5 y ABCG8 fueron evaluados por PCR-RFLP. La distribución de genotipos de los polimorfismos de ABCG5/ABCG8 se encontraba en equilibrio de Hardy-Weinberg. Nuestros resultados mostraron que los polimorfismos estudiados no se asociaron con la respuesta a la ezetimiba. Sin embargo, el alelo T del polimorfismo rs6544718 fue relacionado con niveles basales elevados de LDL-colesterol (p <0,001). Además, el alelo G para el polimorfismo rs4148211 se asoció con una mayor concentración basal de triglicéridos (p = 0,019). Este alelo también se asoció con concentraciones más bajas de HDL-colesterol (p = 0,027), después del tratamiento con ezetimiba. Nuestros resultados sugieren que los polimorfismos estudiados no afectan a la respuesta terapéutica a la ezetimiba en los sujetos evaluados.

Frequency of common variants in genes involved in lipid-lowering response to statins in Chilean subjects with hypercholesterolemia / Frecuencia de polimorfismos en genes relacionados a la respuesta terapéutica a estatinas en individuos chilenos con hipercolesterolemia

Interindividual differences in activity and expression of the metabolizing enzymes cytochrome P450 (CYP) 3A4 and 3A5 and the multidrug efflux pump P-glycoprotein (P-gp, encoded by ABCB1 gene) contribute considerably to lipid-lowering efficacy of statin treatment in subjects with hypercholesterolemia. Variability in the activity of CYP3A4, CYP3A5 and P-gp could be considered to result from genetic polymorphisms encoding their genes. However, the available data indicate that the frequencies of ABCB1, CYP3A4 and CYP3A5 gene polymorphisms differ significantly across populations. Thus, the aim of the present study was to determine the allelic frequency of three common variants of these genes in Chilean individuals with primary hypercholesterolemia (HC) and controls. A total of 135 unrelated patients (44 +/- 7 years old) with diagnosis of hypercholesterolemia (Total cholesterol 240 mg/dL) and 120 normolipidemic healthy controls (40 +/- 10 years old; total cholesterol 200 mg/dL) were included in this study. The 3435C>T (MDR1), -290A>G (CYP3A4) and 6986A>G (CYP3A5) gene polymorphisms were analyzed by PCR-RFLP. The genotype distribution for 3435C>T variant of ABCB1 in HC patients (CC: 49 percent, CT: 37 percent, TT: 14 percent) and controls (CC: 41 percent, CT: 48 percent, TT: 11 percent) was comparable (P=0.186). Similarly, the genotype distribution for -290A>G polymorphism of CYP3A4 in HC subjects (AA: 73 percent, AG: 27 percent, GG: 0 percent) and controls (AA: 71 percent, AG: 29 percent, GG: 0 percent) was equivalent (P = 0.863). Finally, the genotype distribution for 6986A>G variant of CYP3A5 in HC individuals (AA: 4 percent, AG: 41 percent, GG: 55 percent) and controls (AA: 4 percent, AG: 47 percent, GG: 49 percent) was similar (P=0.594). The allelic frequencies of 3435C>T (ABCB1), -290A>G (CYP3A4) and 6986A>G (CYP3A5) polymorphisms are similar between Chilean HC patients and controls, and comparable to frequencies found in Asian populations.

Polimorfismos de los genes CYP3A4, CYP3A5 y ABCB1 se han asociado a variaciones en la respuesta a fármacos hipolipemiantes, como las estatinas; principales medicamentos utilizados para disminuir los niveles plasmáticos de colesterol (CT). Sin embargo, la frecuencia de estas variantes genéticas puede variar entre las poblaciones. Así, el objetivo de este trabajo fue evaluar la frecuencia de tres polimorfismos de los genes CYP3A4, CYP3A5 y ABCB1, relacionados previamente a la respuesta a estatinas, en individuos chilenos hipercolesterolémicos (HC) y controles. Se analizaron 135 sujetos con diagnóstico de hipercolesterolemia primaria (CT 240 mg/dL) y 120 controles (CT 200 mg/dL) pertenecientes a la Región de La Araucanía (Chile). La genotipificación de las variantes genéticas se efectuó mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa seguido de restricción enzimática (PCR-RFLP). La distribución de genotipos para la variante 3435C>T del gen ABCB1 en los individuos HC (CC: 49 por ciento, CT: 37 por ciento, TT: 14 por ciento) y controles (CC: 41 por ciento, CT: 48 por ciento, TT: 11 por ciento) fue semejante (P = 0,186). De forma similar, la distribución de genotipos para el polimorfismo -290A>G del gen CYP3A4 en los pacientes HC (AA: 73 por ciento, AG: 27 por ciento, GG: 0 por ciento) y controles (AA: 71 por ciento, AG: 29 por ciento, GG: 0 por ciento) fue equivalente (P = 0,863). Del mismo modo, la distribución de genotipos para la variante 6986A>G del gen CYP3A5 en el grupo HC (AA: 4 por ciento, AG: 41 por ciento, GG: 55 por ciento) y grupo control (AA: 4 por ciento, AG: 47 por ciento, GG: 49 por ciento) fue similar (P = 0,594). En resumen, nuestro estudio demuestra que las frecuencias de los polimorfismos 3435C>T (ABCB1), -290A>G (CYP3A4) y 6986A>G (CYP3A5) no difieren entre individuos HC y controles, y son comparables a las frecuencias encontradas en poblaciones asiáticas. Su efecto sobre el tratamiento con estatinas en la población chilena debe ser...

Efecto del propóleos chileno sobre el metabolismo de glucosa en ratones diabéticos / Effect of chilean propolis on glucose metabolism in diabetic mice

En el presente estudio se evaluó el efecto del propóleos sobre el metabolismo de la glucosa en ratones C57/BL-6 con diabetes mellitus tipo 2 inducida por dieta alta en grasa. Se midieron los cambios en las concentraciones séricas de lípidos, glucosa e insulina, y el efecto sobre la captación de 2-deoxi-[2,6-3H]-D-glucosa, síntesis de [14C]-glicógeno y descarboxilación de [U-14C]-D-glucosa inducida por insulina en músculo aislado. Los resultados muestran que en ratones diabéticos, el tratamiento con propóleos (150 mg/kg/día) reduce los niveles de insulina e índice HOMA (P<0.05). También disminuyó la obesidad abdominal de estos animales (P<0.05). Por otro lado, no modificó las concentraciones plasmáticas de glucosa, colesterol total y triglicéridos. Se observó también que la captación de 2-deoxi-[2,6-3H]-D-glucosa, síntesis de [14C]-glicógeno y descarboxilación de [U-14C]-D-glucosa inducida por insulina en músculo sóleo de ratones tratados con propóleos fue significativamente superior al grupo control (P<0.05). En resumen, nuestros datos confirman que el propóleos es capaz de modular el metabolismo de glucosa en ratones C57/BL-6 con diabetes mellitus tipo 2 inducida por dieta alta en grasa. Los datos obtenidos constituyen un importante antecedente que avala el posible uso del propóleos como fuente de polifenoles con actividad antidiabetogénica.

In the current study, we investigated the effect of propolis on diabetic mice undergoing propolis treatment (150 mg/kg/day) for a 6 week period. We also evaluated serum lipids, glucose, insulin levels and the effect on glucose uptake of 2-deoxy-D-[2,6-3H] glucose, [14C]-glycogen synthesis and [U-14C]-D-glucose decarboxylation induced by insulin in muscle tissue. Our results show that treatment with propolis (150 mg/kg/day) reduced insulin and HOMA index (P<0.05). Propolis also lowered abdominal obesity (P<0.05). No effects over serum glucose, total cholesterol and triglycerides levels were observed. We also observed that uptake of 2-deoxy-D-[2,6-3H] glucose, [14C]-glycogen synthesis and [U-14C]-D-glucose decarboxylation induced by insulin in soleus muscle of mice treated with propolis were significantly greater than control group (P<0.05). In summary, our data establishes that propolis modulates glucose metabolism. This result constitutes important data indicating that propolis can be used as a polyphenols source with antidiabetogenic activity.

Polimorfismo rs3091244 del gen de la proteína C reactiva influencia los niveles séricos de CRP-hs en individuos de la región de La Araucanía / Single nucleotide polymorphism rs3091244 of CRP gene is associated with higher levels of hs-CRP in Chilean subjects

Introducción: Múltiples genes y sus polimorfismos han sido asociados al origen de la formación de la placa aterosclerótica y subsecuentemente el desarrollo de enfermedad cardiovascular. Uno de estos genes implicados, es el que codifica para la proteína C reactiva (CRP), importante marcador proinflamatorio y de inflamación. Entre las variantes identificadas en este gen, el polimorfismo rs3040244 C>T>A ha sido asociado a elevados niveles de CRP-hs. Sin embargo, los resultados obtenidos entre poblaciones son contradictorios. Objetivo: investigar la asociación entre el polimorfismo rs3091244 y niveles séricos de CRP-hs en individuos de la región de La Araucanía. Métodos: Se determinó la concentración sérica de CRP-hs a 157 sujetos adultos sin parentesco entre ellos. La genotipificación del polimorfismo rs3091244 se realizó mediante la técnica de PCR-RFLP Resultados: La distribución de genotipos para el polimorfismo rs3091244 del gen CRP fue la siguiente: CC 11.5 por ciento, CT 45.2 por ciento, TT 31.2 por ciento, CA 5.0 por ciento y TA 7.0 por ciento. Los portadores de los genotipos TT y TA presentaron elevadas concentraciones séricas de CRP-hs cuando comparadas al genotipo de referencia CC (p=0.030 y p=0.002, respectivamente). Conclusión: Nuestros datos demuestran que el polimorfismo rs3091244 del gen CRP contribuye para el aumento de los niveles séricos de CRP-hs, y por tanto incrementa el riesgo cardiovascular.

Background: Several genes and their polymorphisms have been associated with atherosclerotic plaque formation and subsequent development of cardiovascular disease. One of them is the C-reactive protein (CRP) encoding gene, CRP being a recognized important pro-inflammatory and inflammatory marker. Biallelics and triallelics single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the promoter region of this gene have been identified. The rs3040244 C>T>A is known as the variant most strongly associated with high hs-CRP levels. However, the results between populations are contradictory. Thus, the purpose of this study was to investigate the possible association between the rs3091244 polymorphism and serum levels of hs-CRP in Southern Chilean individuals. Methods: We determined the serum hs-CRP in 157 unrelated adult subjects. The rs3091244 polymorphism was detected by PCR-RFLP. Results: The genotype distribution for the rs3091244 polymorphism of the CRP gene was as follows: CC 11.5 percent, CT 45.2 percent, TT 31.2 percent, CA 5.0 percent and TA 7.0 percent. Individuals carrying the TT and TA genotypes showed higher serum hs-CRP when compared to the reference CC genotype (p = 0.030 and p = 0.002, respectively). Conclusion: Our data shows that the rs3091244 SNP of the CRP gene contributes to increase the hs-CRP levels, which may imply an increased cardiovascular risk.

Polimorfismo SNP-43 del gen de calpaína-10 en individuos con enfermedad coronaria y controles / SNP43 polymorphism of Calpain-10 gene in Southern Chilean subjects with coronary artery disease and controls

Resumen: La Diabetes mellitus tipo 2 (DMT2) es un reconocido factor de riesgo cardiovascular que ha mostrado asociación con aterosclerosis subclínica; lo cual podría ser explicado por la presencia de una base genética común entre ambas patologías. Varios polimorfismos del gen de calpaína-10 (CAPNIO) han sido asociados con insulino resistencia y DMT2, sin embargo, existe escasa evidencia de su relación con enfermedad coronaria. El objetivo del presente estudio fue evaluar la posible asociación de la variante SNP-43 de CAPNIO con el desarrollo de enfermedad coronaria en individuos del sur de Chile. Métodos: Fueron incluidos en este estudio, 218 pacientes adultos no relacionados con enfermedad arterial coronaria (EAC) confirmada mediante angiografía (estenosis >70 por ciento) y 194 individuos controles. La variante genética UCSNP-43 fue estudiada por PCR-RFLP. Resultados: No se observaron diferencias significativas entre las frecuencias genotípicas de la variante UCSNP-43 en pacientes con EAC (GG: 51.4 por ciento; GA: 42.7 por ciento; AA: 5.9 por ciento) y controles (GG: 59.6 por ciento; GA: 35.1 por ciento; AA: 5.2 por ciento, p=0.228). Similarmente, no hubo diferencias significativas entre las frecuencias alélicas entre pacientes con EAC y controles (p=0.200). La Odds Ratio fue de 1.17 (I.C 95 por ciento: 0.50-2.72), confirmando la ausencia reasociación. Conclusión: Nuestros datos sugieren que la variante UCSNP-43 del gen CAPNIO no está asociada a la presencia de enfermedad arterial coronaria en la población investigada.

Background: Diabetes mellitus type 2 (DMT2) is a well know cardiovascular risk factor and has been related to subclinic atherosclerosis, which might be explained by the presence of a common genetic basis in both diseases. Several polymorphisms of the cal-pain-10 gene (CAPNIO) have been associated with insulin resistance and DMT; nevertheless, there is insufficient evidence about their relation with coronary artery disease (CAD). Thus, in the present study we investigated the possible association between the SNP-43 variant of CAPNIO and the presence of CAD in Chilean subjects. Methods: A total of 218 unrelated patients with diagnosis of CAD confirmed by angiography (33-74 years old) and 194 healthy controls (30 - 68 years old) were included in this study. The SNP43 variant of the CAPNIO gene was evaluated by PCR-RFLP. Results: The genotype distribution for SNP43 variant of CAPNIO gene in CAD patients (GG: 51.4 percent; GA: 42.7 percent; AA: 5.9 percent) and controls (GG: 59.6 percent; GA: 35.1 percent; AA: 5.2 percent) was similar (P=0.228). Similarly, the allelic frequency was no different (P = 0.200). The OR for CAD related to AA homozygous genotype was 1.17 (95 percent C.I. = 0.50 - 2.72), confirming the absence of association. Conclusion: These findings suggest that the SNP43 polymorphism of the CAPNIO gene is not associated to CAD in the studied individuals.

Asociación del polimorfismo rs2241766 del gen de la adiponectina y enfermedad arterial coronaria en individuos del sur de Chile / Association between single nucleotide polymorphism of adiponectin gene and coronary artery disease in Southern Chilean subjects

La adiponectina, hormona peptídica secretada por los adipocitos, actúa inhibiendo la formación de la placa ateromatosa en casi todas sus etapas, ya sea modulando la respuesta inflamatoria, inhibiendo la expresión de moléculas de adhesión, la activación de monocitos, la formación de células espumosas y la migración y proliferación de células de músculo liso. En el presente estudio, fue evaluada la frecuencia del polimorfismo 45TMJ (rs2241766) del gen que codifica para la hormona adiponectina (ADIPOQ), junto con su posible contribución al desarrollo de enfermedad coronaria en individuos del sur de Chile. Métodos: Fueron evaluados 416 individuos adultos (30 a 68 años); 200 casos confirmados por angiografía y 216 controles. La genotipificación del polimorfismo 451>G del gen ADIPOQ se realizó mediante la técnica de PCR-RFLP. Resultados: El análisis de los resultados demuestra que la presencia del alelo G del polimorfismo 45T>G del gen ADIPOQ duplica el riesgo de padecer enfermedad coronaria en la población estudiada (OR= 2.06; I.C.95 por ciento: 1.36-3.14). Conclusión: Nuestros datos revelaron la existencia de una interesante asociación entre el polimorfismo 45T>G del gen ADIPOQ y enfermedad arterial coronaria en los sujetos analizados. Es importante destacar, que este hallazgo constituye el primer antecedente en población chilena.

Background: Adiponectin, encoded by ADIPOQ gene, is a hormone secreted by adipocytes that acts inhibiting the atheromatous plaque formation, modulating the inflammatory response and inhibiting the expression of adhesion molecules with subsequent inhibition of adhesion and macrophage activation, foam cells formation and migration and proliferation of smooth muscle cells. Aim: to evaluate the possible association between the rs2241766 polymorphism of the ADIPOQ gene with coronary artery disease (CAD) in Southern Chilean subjects. Methods: We evaluated 416 unrelated individuals (38 -68 years old); 200 with CAD confirmed by angiography and 216 control individuals from Temuco city (Chile). The rs2241766 polymorphism (45T>G) of ADIPOQ gene was determined by PCR-RFLP. Results: CAD patients exhibited a high frequency of G allele when compared to controls (17 percent vs. 9 percent; p<0.001). The OR for CAD associated to G allele was 2.06 (95 percent CI: 1.36 - 3.14) confirming the association observed. Conclusion: Our data show that the rs2241766 ADIPOQ gene polymorphism contributed to CAD risk in the studied population.

Presencia del alelo T para el polimorfismo rs2781666 G>T del gen arginasa 1 constituye un factor protector contra enfermedad arterial coronaria / The presence of T allele for rs2781666 G>T common variant of arginase 1 gene constitutes a protector factor against coronary artery disease in Southern Chilean subjects

Introducción: Variaciones moleculares en el gen de la arginasa I, ARGl, podrían provocar un aumento de la expresión de la enzima o de su actividad, lo que puede llevar a una disfunción endotelial al disminuir la producción de óxido nítrico por parte de la eNOS. Así, el objetivo del presente estudio fue investigar la posible asociación del polimorfismo rs2781666 G>T y la presencia de enfermedad coronaria (confirmada con angiografía) en individuos de la región de La Araucanía. Material y Métodos: En el presente estudio, de tipo casos y controles, fueron evaluados 247 sujetos, con edades entre 30 y 74 años; 124 individuos pacientes con enfermedad arterial coronaria (casos) y 123 controles. La genotipificación del polimorfismo rs2781666 del gen ARGl fue realizada mediante PCR- RFLR Resultados: La frecuencia del genotipo homocigoto TT para el polimorfismo rs2781666 del gen ARGl fue de 6.5 por ciento en el grupo casos y 8 por ciento en el grupo control, difiriendo significativamente (p=0.032). La frecuencia relativa del alelo T también presentó diferencias significativas entre casos y controles (0.230 vs. 0.325, p=0.031). La OR relacionada al alelo mutado T fue de 0.63 (I.C. 95 por ciento, 0.43 - 0.94), confirmando la presencia de la asociación observada. Conclusión: Los resultados obtenidos sugieren que el polimorfismo rs2781666 G>T del gen ARGl confiere protección contra enfermedad coronaria en la población analizada. Sin embargo, este resultado debe ser replicado en otros grupos poblacionales de nuestro país.

Background: Recent data support a role for arginase 1 (ARG1) in the initiation, development, and complications of coronary artery disease. Thus, in the present study we investigated the possible association between the rs2781666 G>T variant of ARG1 and the presence of CAD confirmed by angiography in Chilean subjects. Methods: A total of 124 unrelated patients with diagnosis of CAD confirmed by angiography (stenosis > 70 percent) and 123 healthy controls (30 - 74 years old) were included in this study. The rs2781666 G>T variant of the ARG1 gene was evaluated by PCR-RFLR Results: The frequency of TT homozygous genotype in CAD patients was lower when compared to control group (6.5 percent vs. 8.0 percent, p=0.032). Similarly, the T allele frequency was different between CAD and control groups (0.230 vs. 0.325, p=0.031). The OR for CAD related to T allele was 0.64 (95 percent CI. = 0.43-0.94), con-firming the association founded. Conclusion: These findings suggest that the T allele for rs2781666 polymorphism of the ARG1 gene constitutes an inherited protective factor against CAD in Southern Chilean subjects.

Polimorfismos genéticos de APOA5 se asocian a hipertrigliceridemia e hiperglicemia en individuos chilenos con enfermedad coronaria y controles / Genetic polymorphisms of APOA5 are associated with hypertriglyceridemia and hyperglycemia in Chilean subjects with coronary artery disease and controls

Introducción: Diversas variantes genéticas han sido relacionadas al desarrollo de enfermedad coronaria y/o sus factores de riesgo; entre ellas, los polimorfismos S19W y -1131T>C del gen que codifica para la apolipoproteína A5 (APOA5). Así, el objetivo del presente estudio fue investigar la posible asociación entre las variantes S19W y -1131T>C del gen APOA5 y enfermedad coronaria en individuos chilenos. Métodos: Se evaluaron 425 sujetos adultos, no relacionados; 209 pacientes con enfermedad coronaria (EC) comprobada por angiografía (estenosis→ 70 por ciento), con edades entre 33 y 74 años, y 216 individuos controles (30 a 68 años). La genotipificación de los polimorfismos S19Wy -1131T>C del gen APOA5 fue realizada mediante la técnica de PCR-RFLP Resultados: La distribución de los genotipos para el polimorfismo S19W del gen APOA5 en el grupo casos (SS: 80 por ciento, SW: 19 por ciento y WW: 1 por ciento) y en el grupo control (SS: 82 por ciento, SW: 17 por ciento y WW: 1 por ciento) fue semejante (p=NS). La distribución genotípica para el polimorfismo -1131T>C en pacientes con EC (TT: 56 por ciento, TC: 37 por ciento, y CC: 7 por ciento) y controles (TT: 63 por ciento, TC: 30 por ciento y CC: 7 por ciento) fue similar (p=NS). Las ORs relacionadas a los alelos mutados 19W (1.12; I.C.95 por ciento, 0.72- 1.74, p=NS)y-1131C (1.19; I.C.95 por ciento,, 0.87- 1.63, p=NS), confirman la ausencia de asociación. Por otro lado, las concentraciones de triglicéridos y glucosa en ayunas fueron significativamente más elevadas en los sujetos portadores de los alelos 19Wy -1131C, tanto en casos como en controles (p<0.05). Conclusión: La asociación observada entre las variantes genéticas de APOA5 y las altas concentraciones séricas de triglicéridos y glucosa, en ambos grupos, sugiere que estos polimorfismos podrían contribuir al desarrollo de la dislipidemia diabética; un reconocido factor de riesgo para enfermedad arterial coronaria.

Background: Several genetic variants have been linked to the development of coronary heart disease and/or their risk factors, including the S19Wand-1131T> C polymorphisms of the gene that encodes apolipoprotein A5 (APOA5). Thus, the objective of this study was to investigate the possible association between S19W and -1131T>C genetic variants ofAPOA5 and coronary disease in Chilean individuals. Methods: We evaluated 425 not related subjects; 209 patients with coronary artery disease (CAD) confirmed by angiography (stenosis→ 70 percent,), aged between 33 and 74 years, and 216 control individuals (30 to 68 years). The genotyping of S19W and -1131T>C polymorphisms of APOA5 gene was evaluated by PCR-RFLP. Results: The genotype distribution of S19W polymorphism of APOA5 gene in CAD patients (SS: 80 percent,, SW: 19 percent, WW: 1 percent>) and controls (SS: 82 percent,, SW: 17 percent, WW: 1 percent>) was similar (p = NS). In the same way the genotype distribution of-1131T>C genetic variant in CAD subjects (TT: 56 percent,, TC: 37 percent,, and CC: 7 percent>) and controls (TT: 63 percent,, TC: 30 percent, and CC: 7 percent) was equivalent (p = NS). The Odds ratios related to the mutant alleles 19W (1.12, 95 percent, Cl, 0.72 - 1.74, p = NS) and -1131C (1.19, 95 percent, Cl, 0.87 -1.63, p = NS) confirms the absence of association. On the other hand, the triglycerides and fasting glucose concentrations were significantly higher in subjects carrying the alleles 19W and -1131C, in both groups, CAD patients and controls (p <0.05). Conclusion: The observed association between genetic variants of APOA5 and higher serum levels of triglycerides and glucose, in both groups, suggesting that these polymorphisms could be contribute to the development of diabetic dyslipidemia, a known risk factor for coronary artery disease.

Polimorfismo Pro72Arg del gen TP53 se asocia a enfermedad coronaria en individuos chilenos / TP53 codon 72 polymorphism is associated with coronary artery disease in Chilean subjects

Introducción: Diferentes genes han sido implicados en la etiología de la enfermedad arterial coronaria, entre ellos, el gen TP53. Recientemente, el polimorfismo en el codon 72 (Pro72Arg, rs1042522) del gen TP53 fue señalado como factor de riesgo para enfermedad arterial coronaria. Sin embargo, otros autores no han confirmado esta observación. Así, en el presente estudio investigamos la posible asociación entre esta variante genética y la presencia de enfermedad arterial coronaria en individuos chilenos. Métodos: Se analizaron 209 pacientes, no relacionados, con diagnóstico de enfermedad arterial coronaria confirmada por angiografía (estenosis > 70 por ciento), 33 - 74 años y 216 individuos controles (30-68 años). Las concentraciones séricas de glucosa, acido úrico, triglicéridos, colesterol total y colesterol HDL fueron determinados por métodos enzimático-colorimétricos. El polimorfismo Pro72Arg del gen TP53 fue identificado mediante la técnica de reacción en cadena de polimerasa seguida de restricción enzimática (PCR-RFLP). Resultados: La distribución de genotipos para la mutación Pro72Arg del gen TP53 en pacientes y controles fue significativamente diferente (P=0.003). Adicionalmente, la frecuencia relativa de alelos fue tambiéndiferente (P=0.003). La OR para enfermedad coronaria relacionada al alelo 72Arg fue 2.0 (I.C.95 por ciento=1.33-2.90), confirmando la presencia de asociación. Por otro lado, no encontramos asociación entre los factores de riesgo tradicionales para enfermedad coronaria y los diferentes genotipos del polimorfismo Pro72Arg. Conclusión: Nuestro estudio muestra una interesante asociación entre enfermedad coronaria y el polimorfismo Pro72Arg del gen TP53 en individuos chilenos, sugiriendo que esta mutación podría ser útil como marcador genético de esta patología. Sin embargo, esta observación necesita ser reconfirmada con un estudio poblacional.

Different genes have been implicated in the aetiology of coronary artery disease, among these, the TP53 gene. Recently, the codon 72 polymorphism (Pro72Arg, rs1042522) of TP53 gene was indicated as a risk factor for coronary artery disease (CAD). However, other authors do not confirm this observation. Thus, in the present study we investigated the possible association between this genetic variant and the presence of CAD in Chilean subjects. Methods: 209 unrelated patients with diagnosis of CAD confirmed by angiography (33-74 years old) and 216 healthy controls (30 - 68 years old) were included in this study. The Pro72Arg polymorphism of the TP53 gene was evaluated by PCR-RFLP. Results: The genotype distribution for Pro72Arg variant of TP53 gene in CAD patients (PP: 6.2 percent, PR: 29.2 percent, RR: 64.6 percent) and controls (PP: 8.3 percent, PR: 43.5 percent, RR: 48.1 percent) was significantly different (P=0.003). Similarly, the allelicfrequency was also different (P = 0.003). The OR for CAD related to 72Arg allele was 2.0 (95 percent C.I. = 1.33 -2.90). Conclusion: These findings suggest that the Pro72Arg polymorphism of the TP53 gene is associated with CAD in study Chilean individuals.